期刊简介
本刊是我国口腔颌面外科界最早的一本专业性学术期刊。主要刊登口腔颌面外科及相关学科的基础与临床研究的新成果、新技术，以及临床经验等文摘。设有专家论坛、基础研究、临床研究、临床总结、病例报道、综述、讲座等栏目。内容丰富、信息量大、读者面广，深受口腔医学院师生、口腔颌面外科和相关学科的医务人员及科技工作者的欢迎。
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首页>口腔颌面外科杂志
- 杂志名称：口腔颌面外科杂志
- 主管单位：中华人民共和国教育部
- 主办单位：同济大学
- 国际刊号：1005-4979
- 国内刊号：31-1671/R
- 出版周期：双月刊
期刊荣誉：第二届上海市优秀科技期刊评比三等奖期刊收录：知网收录(中), 上海图书馆馆藏, 国家图书馆馆藏, 维普收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 万方收录(中), CA 化学文摘(美)
低氧诱导因子-1α慢病毒载体的构建及其在骨髓基质干细胞内表达的检测
王瀛；张凯；邹多宏；何家才；王元银；周健
关键词：低氧诱导因子1α, 慢病毒载体, 骨髓间充质干细胞
摘要：目的:构建低氧诱导因子-1α(HIF-1α)的慢病毒载体(Lenti-HIF-1α),转染骨髓基质干细胞(bone marrow stromal cells,BMSCs)后,检测HIF-1α在BMSCs内的表达,并鉴定其位置.方法:根据人的HIF-1α基因(NM_001530)序列行引物设计及序列片段的PCR扩增,将目的基因PCR产物连接到载体pEGFP-N1上,构建真核表达载体pEGFP-N1-HIF-1 α.将目的基因PCR产物和目的载体用NheI和BamHI分别进行酶切,对质粒进行鉴定.采用LR重组系统将目的序列重组到慢病毒载体plenti6.3V5-DEST上,构建慢病毒载体Lenti-HIF-1α (Lenti-LacZ为对照组).检测慢病毒滴度后,转染BMSCs,检测目的基因的表达.通过细胞免疫组织化学法观察HIF-1α在BMSCs内的位置.结果:通过对构建质粒克隆进行测序及酶切,证实真核表达载体pEGFP-N1-HIF-1α构建成功.用Lenti-HIF-1α转染BMSCs细胞,0、1、4、7、14和21 d后qPCR检测.结果表明HIF-1α在转染后的第4天开始有明显的过表达,且持续到第21天.细胞免疫组织化学结果显示目的基因位于BMSCs的核内.结论:成功构建了慢病毒载体Lenti-HIF-1α,且转染的目的基因位于BMSCs细胞核内,为HIF-1α介导的BMSCs进行体内实验研究奠定了基础.
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